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Introducción:
Preservar la vitalidad pulpar es uno de los principales objetivos en Odontología; debido a esta necesidad, han surgido diversos materiales que deben ser sometidos a pruebas de biocompatibilidad, con el fin de observar el efecto sobre las células pulpares al entrar en contacto directo o indirecto con estos materiales.
Estas pruebas comúnmente son realizadas sobre líneas celulares que han tenido algún cambio genético, donde se han alterado sus características morfológicas, de crecimiento y de comportamiento, dificultando así hacer una extrapolación de los resultados obtenidos al tejido pulpar humano, por lo que es necesario realizar estudios en cultivos primarios de células pulpares humanas. Ante esta necesidad, se presenta una técnica de estandarización de cultivo de fibroblastos pulpares humanos, con el fin de identificar los requerimientos esenciales mínimos que permitan el crecimiento de los fibroblastos pulpares in vitro, facilitando así la obtención de dichas células en un tiempo mínimo y buena calidad para poder utilizarlas posteriormente en los diversos tipos de estudios que las requieran.
Materiales y métodos:
Se tomaron pulpas provenientes de 6 dientes sanos; se distribuyeron en tres frascos con los siguientes medios de transporte MEM, MEM + penicilina/estreptomicina, MEM + penicilina/estreptomicina + anfotericina B; se realizaron los explantes y se les agregó el medio de cultivo con las siguientes variaciones: MEM + SFB 10% + penicilina/estreptomicina, MEM + SFB 10% + penicilina/estreptomicina + anfotericina B, MEM + SFB 20 % + penicilina/estreptomicina y MEM + SFB 20% + penicilina/estreptomicina + anfotericina B. Se observaron mediante el microsccópio de fase invertida y se realizaron coloraciones de Gram y cultivos en agar sangre, para evidenciar contaminación.
Conclusiones:
De acuerdo con los resultados encontrados en el estudio, se puede concluir que el medio de transporte no ejerció influencia directa sobre el crecimiento celular, aunque la contaminación fue mayor cuando se utilizó sin antibiótico ni antimicótico.
Los mejores de cultivo para obtener una formación de monocapa durante el cultivo de fibroblastos pulpares humanos son:
- MEM suplementado con suero fetal bovino al 20%, más antibiótico (penicilina 100 U/ml/estreptomicina 100 mg /ml).
- MEM enriquecido con SFB al 10%, más antibiótico (penicilina 100 U/ml/estreptomicina 100 mg /ml).
Las variaciones en la concentración del SFB (10-20%) en el medio de cultivo, no son relevantes para la proliferación celular, puesto que se observó crecimiento celular en las dos concentraciones.
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